二甲双胍对子宫肌瘤组织中雌激素合成相关酶及ER表达的调控作用

P450arom 是雌激素合成最为重要的限速酶，能催化雄烯二酮和睾酮分别转化为雌酮和雌二醇，是雌激素合成的最后一步［17］。研究证实，在体外单独用雄烯二酮培养子宫肌瘤细胞不仅可以合成雌二醇，细胞增殖情况也与单独加入雌二醇培养的结果相当，而以上作用在加入P450arom抑制剂后被拮抗［15］，证明子宫肌瘤组织可以原位合成足够的雌激素以维持自身的生长，且P450arom在其中发挥了至关重要的作用。本研究证实，P450arom在子宫肌瘤组织中高表达，与既往研究的结果一致，其作为雌激素合成过程中的关键限速酶，在子宫肌瘤的发病过程中发挥着显著作用。

雌激素主要通过与ERα和ERβ结合发挥对靶细胞的生理作用。诸多研究发现，在乳腺癌、卵巢上皮性癌、结肠癌和前列腺癌等肿瘤组织中存在ERα mRNA/ERβ mRNA的比值升高或ERβ mRNA表达水平降低的现象［18⁃20］，提示，ERα和ERβ在细胞的癌变过程中可能发挥相反的作用［21］，当ERαmRNA/ERβ mRNA的比例失衡时可能导致细胞增殖失控［22］。较多研究证实，子宫肌瘤组织中ERα和ERβ mRNA的表达水平较子宫肌层组织中显著升高［6，23］；也有一些学者认为，子宫肌瘤组织中ERα的表达水平升高更加明显，且ERα与ERβ的比例存在失衡［7，23］。提示，ERα与ERβ的比例失衡可能会对细胞的雌激素敏感性造成影响［7］，从而促进子宫肌瘤的生长。

本研究结果表明，子宫肌瘤组织中ERα mRNA的表达水平及ERα mRNA/ERβ mRNA的比值较正常子宫肌层组织明显升高，提示，雌激素主要通过激活ERα诱导子宫肌瘤的形成，ERα与ERβ的比例失衡可能与子宫肌瘤局部组织的细胞增殖与凋亡失衡相关，但其作用机制或许更加复杂，有待进一步研究。

二甲双胍作为1种口服降血糖药，通过提高胰岛素的敏感性降低血糖而被广泛应用于2型糖尿病患者。流行病学研究显示，二甲双胍可以显著降低恶性肿瘤的患病率和死亡率；体外实验证实，二甲双胍具有抑制肿瘤细胞生长的作用［12，24⁃26］；且二甲双胍还可以抑制异位子宫内膜间质细胞中PGE2诱导的P450arom的表达［13⁃14］。目前，已有研究验证了二甲双胍可通过激活腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）抑制雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路，进而抑制子宫肌瘤细胞的增殖并诱导其凋亡，但是二甲双胍在子宫肌瘤中对P450arom和ER的作用少有报道。

本研究证明了在子宫肌瘤细胞中，二甲双胍对雌激素合成相关酶及ER mRNA的作用，并且证实了二甲双胍能够明显抑制P450arom mRNA 的表达。而P450arom mRNA表达水平的下调可能进一步引起P450arom活性降低，导致局部病灶的雌激素水平下降，阻碍子宫肌瘤的生长，其机制有待进一步研究。此外，在原代子宫肌瘤细胞的培养过程中，由于培养基中激素、蛋白的成分和含量与人体血清中不同，可能使其中P450arom和ER的表达水平与在体子宫肌瘤细胞中的实际表达水平存在差异，这一点也需要在后续研究中考虑。目前，唯一获得美国食品药品管理局（FDA）批准的治疗子宫肌瘤的药物是促性腺激素释放激素激动剂，但因其可导致严重的围绝经期症状而不能长期使用。P450arom抑制剂虽然因低雌激素引起的不良反应较轻微，但长期应用对卵泡发育和生殖功能的影响尚需进一步评估。相比较而言，二甲双胍具有较高的药物安全性，临床耐受性较好，常见的不良反应为胃肠道反应，严重不良反应包括乳酸酸中毒，但发生率极低［27］。因此，探索二甲双胍在治疗糖尿病以外的适应证（如子宫肌瘤）的最佳剂量尤为重要。糖尿病治疗剂量的二甲双胍的血浆浓度为10～100 μmol/L［24⁃26］，因此，本研究在参考既往研究设计的基础上，将二甲双胍的药物处理浓度分别设定为10、50 和100 μmol/L［27］。本研究证实，二甲双胍可以显著下调子宫肌瘤细胞中P450arom mRNA的表达水平，但未发现明显的剂量依赖效应。